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猴结核分枝杆菌抗体IgGELISA试剂盒使用说明书

  • 所属分类其它资料

    上传时间2017/10/17

  • 文件类型jpg

    文件大小22 KB

  • 浏?#26469;?#25968;2127次

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  • 标签试剂盒  

资料简介

实验原理

本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中猴结核分枝杆菌抗体 IgG(M.tuberculosis-IgG)表达用纯化的抗原包被微孔板制成固相抗原可与样?#20998;?#32467;核分枝杆菌抗体IgG(M.tuberculosis-IgG)相结合经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与 HRP 标记的抗原结合形成抗原-抗体-酶标抗原复合物经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色并在酸的作用下转化成最终的黄色用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度OD 值与 CUTOFF 值相比较从而判定标本中猴结核分枝杆菌抗体
IgG(M.tuberculosis-IgG)的存在与否

试剂盒组成

1
30 倍浓缩洗涤液
20ml×1 瓶
7
终止液
6ml×1 瓶

2
酶标试剂
6ml×1 瓶
8
阳性对照
0.5ml×1 瓶

3
酶标包被板
12 孔×8 条
9
阴性对照
0.5ml×1 瓶

4
样品稀释液
6ml×1 瓶
10
说明书
1 份

5
显色剂 A 液
6ml×1 瓶
11
封板膜
2 张

6
显色剂 B 液
6ml×1/瓶
12
密封袋
1 个

标本要求

1标本采集后尽早进行提取提取按相关文献进行提取后应尽快进行实验若不能

马上进行试验可将标本放于-20保存但应避免反复冻融2不能检测含 NaN3 的样品因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的HRP活性

操作步骤

编号将样品对应微孔按序编号每板应设阴性对照 2 孔阳性对照 2 孔空白对照 1 孔空白对照孔不加样品及酶标试剂其余各步操作相同

加样分别在阴阳性对照孔中加入阴性对照阳性对照 50µl然后在待测样品孔先加样品稀释液 40µl然后再加待测样品 10µl加样将样品加于酶标板孔底部尽量不触及孔壁轻轻晃动混匀

温育用封板膜封板后置 37温育 30 分钟

配液将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

洗涤?#30418;?#24515;?#19994;?#23553;板膜弃去液体甩干每孔加满洗涤液静置 30 秒后弃去如此重复 5 次拍干


?#29992;好?#23380;加入酶标试剂 50µl空白孔除外

温育操作同 3

洗涤操作同 5

显色?#22909;?#23380;先加入显色剂 A50µl再加入显色剂 B50µl轻轻震荡混匀37避光显色

15 分钟.

终止?#22909;?#23380;加终止液 50µl终止反应此时蓝色立转黄色

测定以空白空调零450nm 波长依序测量各孔的吸光度OD 值 测定应在加终止液后 15 分钟以内进?#23567;?br />

操作程序总结

计算和结果判定

试验有效性阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10临界值CUT OFF计算临界值=阴性对照孔平均值+0.15

阴 性 判 定 样 品 OD 值 < 临 界 值 CUT OFF 者 为 结 核 分 枝 杆 菌 抗 体

IgG(M.tuberculosis-IgG)阴性阳 性 判 定 样 品 OD 值 ≥ 临 界 值 CUT OFF 者 为 结 核 分 枝 杆 菌 抗 体


IgG(M.tuberculosis-IgG)阳性

注意事项

1操作严格按照说明书进行本试剂不同批号组分不得混用

2试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用酶标包被板开封后如未

用完板条应装入密封袋中保存3浓洗涤液可能会有结晶析出稀释时可在水浴中加温助溶洗涤时不影响结果4 封板膜只限一次性使用?#21592;?#20813;交叉污?#23613;?br />
5底物请避光保存

6试验结果判定必须以酶标仪读数为准使用双波长检测时参考波长为 630nm

7所有样品洗涤液和各种废弃物?#21152;?#25353;传染物处理终止液为 2M 的硫酸使用时必须注意安全

保存条件及有效期

1试剂盒保存?#28023;?-8档

2有效期6 个月

香茅醇 进口特价 Citronellol  含量: >95%
香叶木素   进口/国产 Diosmetin 含量: ≥98%  
辛可尼丁   现货供应 Cinchonidine 含量: ≥98%  
辛可宁   特价促销 Cinchonine 含量: ≥98%  
新穿心莲内酯苷元 进口/国产 ANDROGRAPANIN                                                                                     含量: >95%
新绿原酸 进口/国产 5-caffeoylquinic Acid 含量: ≥97%
雄烯二酮 进口特价 Androstenedione 含量: ≥98%  
绣线?#32773;?nbsp;进口特价 Quercetin 4-glucoside 含量: >98%
雪上一枝蒿乙素 进口/国产 Bullatine B 含量: ≥98%  
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